Expi293F 人胚肾细胞

人

RPM1640培养液82%+10%FBS+DMSO 8% 现用现配

气相: 空气, 95%; CO2, 5%

温度: 37℃，培养箱湿度为70%-80%

将含有1.8mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶（或三角培养瓶）中在带有水平孵育摇床功能的二氧化碳培养箱中水平震荡培养，摇床速度为80-100RPM过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。

如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：

悬浮状态下生长的细胞，可以通过向培养瓶中添加完全培养基来维持细胞的生长状态，建议细胞浓度在2-3×10^6/ml时进行传代，传代后浓度推荐为10^6/ml，可以维持细胞的正常生长。如需分瓶可以将细胞悬液收集到离心管中1000rpm，离心5min，弃去上清，补加1-2mL培养液后重悬混匀后将细胞悬液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力，后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。